Percoll的使用注意事項
更新時間：2019-05-08 點擊次數：3605次
Percoll是一種包有乙烯吡咯烷酮的硅膠顆粒。滲透壓很低(<20mosm/kg H2O), 粘度也很小，可形成高達1.3g/ml密度，采用預先形成的密度梯度時可在低離心力(200～1000g)于數分至數十分鐘內達到滿意的細胞分離結果。由于Percoll擴散常數低，所形成的梯度十分穩定。此外，Percoll不穿透生物膜，對細胞無毒害，因此廣泛用于分離細胞、亞細胞成分、細菌及病毒，還可將受損細胞及其碎片與完好的活細胞分離。
該法是純化淋巴細胞和單核細胞的一種較好的方法，淋巴細胞純度高達98%，單核細胞純度可達78%。因為Percoll具有滲透性低、不穿透細胞、粘度低、密度高和無毒害等優點，與目前常用的密度梯度離心介質，包括蔗糖(Sucrose)、血清白蛋白(Serum albumin, ALB)、聚蔗糖(Ficoll)、氯化銫(CsCl)等相比，是目前較理想的介質。Percoll密度梯度離心已被多次成功地用于動物細胞及其細胞器的分離，純化了包括人血液細胞、骨髓細胞、紅血球細胞、白血球細胞、淋巴細胞、肝細胞等在內的十余種動物細胞。這一技術也開始用于用于分離和純化植物原生質體、核、葉綠體和線粒體。
Percoll的使用注意事項
A. 本分離液是敏光型的，在運輸和貯藏過程中應在18℃-25℃避光保存，啟封后置4℃保存避免微生物污染。另外，本品為真空包裝，未啟封前置于10℃ 以下易出現白色結晶，影響分離效果。
B. 待分離的樣本要求新鮮，避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一定在20℃水浴箱中復溫20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在20℃±2℃時分離效果好，且所有操作過程一定要在無菌條件下進行。
C. 由于各品牌離心機的性能不同，國內南北地區溫度環境和四季的差異，可能影響分離效果，用戶可以調節離心轉數，調節離心的時間，摸索佳的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。
D. 使用無靜電反應的離心管，推薦使用未經過堿處理的玻璃離心管。
